六孔板怎么鋪均勻
6孔板,采用將第一個孔加入少量無血清培養(yǎng)基,晃動浸潤整個孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤孔底,其它孔一次類推,這樣整個孔底都是濕潤的,細胞懸液會平鋪在整個孔底,加細胞懸液的時候可以避免加在中間中間細胞多,而加在周邊晃勻后周邊細胞多中間少的現(xiàn)象,細胞分散較均勻,注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒有96孔板好掌握,效果沒有96孔板好,所以我放棄改用浸潤孔底的方法。
2、細胞懸液加完后,將細胞培養(yǎng)板抬高,對著燈光,從底部往上看,看細胞有沒有抱團。然后從底部敲擊,使之分散。
3、如果實驗室有平板振蕩器的話,我建議用這個儀器稍振蕩一下,效果不錯,就是振幅小,頻率高的那種。
4、細胞要盡量打散,大部分呈單個狀態(tài)。離心后,要充分懸浮!還有轉(zhuǎn)移到六孔板后,是要晃得!晃的時候最好不要讓那個細胞液轉(zhuǎn)圈,不然細胞就全被帶到中間去了,就會不均勻!
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