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正相,反相色譜中固定相,流動相極性有何特點

2021.11.01

在正相色譜中,一般采用極性鍵合固定相,硅膠表面鍵合的是極性的有機基團,鍵合相的名稱由鍵合上去的基團而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)鍵合相。流動相一般用比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機溶劑,如烴類溶劑,或其中加入一定量的極性溶劑(如氯仿、醇、乙腈等),以調節流動相的洗脫強度。通常用于分離極性化合物。一般認為正相色譜的分離機制屬于分配色譜。組分的分配比K值,隨其極性的增加而增大,但隨流動相中極性調節劑的極性增大(或濃度增大)而降低。同時,極性鍵合相的極性越大,組分的保留值越大。

該法主要用于分離異構體,極性不同的化合物,特別是用來分離不同類型的化合物。

反相鍵合相色譜法

在反相色譜中,一般采用非極性鍵合固定相,如硅膠-C18H37(簡稱ODS或C18)硅膠-苯基等,用強極性的溶劑為流動相,如甲醇/水,乙腈/水,水和無機鹽的緩沖液等。

目前,對于反相色譜的保留機制還沒有一致的看法,大致有兩種觀點:一種認為屬于分配色譜,另一種認為屬于吸附色譜。

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