做熒光定量PCR時,△△Ct值是什么意思
△△Ct是熒光定量計算公式的簡化形式,用于比較不同樣品之間的差別或變化比率。
Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX?+lgN/lg(1+Ex),其中,n為擴增反應的循環次數,X?為初始模板量,Ex為擴增效率,N為熒光擴增信號達到閾值強度時擴增產物的量。△Ct(n)=Ct(目的基因)-Ct(內參基因);△△CT(n)=△Ct(n)-△Ct(1)。
起始拷貝數越多,Ct值越小。利用已知起始拷貝數的標準品可作出標準曲線,其中橫坐標代表起始拷貝數的對數,縱坐標代Ct值。因此,只要獲得未知樣品的Ct值,即可從標準曲線上計算出該樣品的起始拷貝數。
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綜述