分光光度（紫外吸收）法檢測 DNA 及 RNA 的純度及濃度
1、預熱
預熱紫外分光光度計10～20min。
2、狹縫石英比色杯
取兩只 1mL 的狹縫石英比色杯，一只裝入 1mL 蒸餾水，作為空白溶液，用來校正分光光度計零點及調整透光度至100。
3、DNA純度及濃度測定
（1）取5μL DNA 待測樣品或4μL RNA 樣品加入另一只比色杯中，加蒸餾水至1000μL，用無菌石蠟膜堵住杯口，倒轉混勻。
（2）將兩只比色杯置分光光度計中，調入射光波長，分別用空白溶液調整零點（T 為100，OD 為0），測定持測樣品液在260nm，280nm，230nm 的 OD 值。
（3）計算濃度：對于雙鏈 DNA 1.0 OD260＝50μg/mL，DNA 樣品濃度（μg/μL）為OD260×N（樣品稀釋倍數）×50/1000。按①方式稀釋被測 DNA 樣品的濃度為其 OD260值的10倍，即 OD260＝0.1時，其濃度為1μg/L。對于單鏈 RNA 1.0 0D260＝40μg/mL。RNA 樣品濃度（μg/μL）為 OD260×N（樣品稀釋倍數）×40/1000。按①方式稀釋被測RNA 樣品的濃度為其 OD260 值的10倍，即 OD260=0.1時，其濃度為1μg/μL。
（4）測定純度：純的 DNA 溶液其 OD260/OD280 應為1.8，OD260/OD230應大于2.0。OD260/OD280大于1.9時，表明有 RNA 污染，小于1.6時表明有蛋白質或酚污染。OD260/OD280小于2.0時，表明溶液中有殘存的鹽和小分子雜質，如核苷酸、氨基酸、酚等。純的 RNA 溶液其 OD260/OD280 的比值應介于1.7至2.0，OD260/OD230 的比值應大于2.0。RNA 樣品 A260/A280 的比值太小，說明有蛋白或苯酚污染；比值大于2.0，則可能被異硫氰酸胍等污染；OD260/OD230 的比值小于2.0時表明有小分子及鹽存在。
