液相出現倒峰的原因
高效液相色譜,色譜柱是Kromasil C18(15cm*5Um),流動相為10%乙腈和90%三氟乙酸水,走空白色譜柱時在整個保留時間的中間位置出現較大的色譜峰,走了好幾針空白,每針的響應都不同,有的很高,有的又很低,但雜峰一直存在,不像是色譜柱里有雜質,用流動相沖洗后依然出現此問題,什么原因?
【分析原因】
1.確定檢測波長,如果是末端吸收,排除三氟乙酸的干擾。
2.使用100%乙腈作為流動相,乙腈作為樣品進樣,如果為基線,則說明色譜柱及系統完好。
3.然后在換流動相為10%乙腈和90%三氟乙酸水,樣品為乙腈,如果有上述“中間位置出現較大的色譜峰”,那說明八成問題在三氟乙酸上,或者稀釋三氟乙酸的水上。
4.如果上述2、3都有“中間位置出現較大的色譜峰”,檢查檢測器及進樣器。
5.這些還不能解決,請聯系工程師
空白乙腈出峰的原因?
高效液相色譜儀,進空白乙腈,在樣品峰位子出現倒峰,進雙蒸水在樣品峰出現正峰,進樣品時有雜峰干擾,我已經排除了水和乙腈的問題,不知道是不是進樣池或者檢測器污染了,已經整了10多天,還是沒效果,請指教原因和解決辦法。
【分析原因】
液相中出現倒峰,主要原因是樣品吸收比流動相吸收小,所以排除影響,不僅要考慮進樣系統污染和檢測池污染,還要考慮流動相和色譜柱的影響。換一根柱子試試,考察系統的情況,如果照舊,就排除色譜柱的影響,然后更換流動相試試,再以后清洗進樣系統和檢測池等等。
或將色譜柱從系統中斷開,直接用乙腈或水做流動相清洗檢測器就可以知道是否是檢測器受污染,如果基線正常,再檢查你的進樣系統,樣品,前處理是否有問題,如果都沒問題,就去檢查色譜柱吧。
-
焦點事件