導讀

尿液干化學聯合尿沉渣檢測，使尿液分析發生了劃時代的變化。自動化程度的日益提高，檢測參數的逐步增加，測試速度的不斷加快，極大地提高了工作效率，減輕了檢驗人員的勞動強度。但由于干化學檢測的局限性、干化學試紙的諸多影響因素以及檢查過程中忽略了許多中間環節，從而直接影響了尿液自動化分析的準確性。我們對尿液干化學檢測過程中經常遇到的干擾因素及注意事項介紹如下。

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?pH、尿蛋白和尿比重的相互影響

干化學法尿蛋白、比重和pH的檢測原理都是基于pH的變化而設計的，這是pH、尿蛋白和比重之間相互影響的根源。pH 5.0~7.0的正常尿液對尿蛋白和尿比重無影響，過低的強酸性尿液幾乎不存在。因此，需要我們引起足夠重視的是pH值升高的強堿性尿。pH升高的病理因素包括堿中毒、原發性醛固酮增多癥、變形桿菌和銅綠假單胞桿菌引起的膀胱炎、腎盂腎炎等尿路感染。許多藥物如枸櫞酸鈉、嘧啶、碳酸類藥物及某些中草藥?？梢鹉蛞簆H值不同程度的升高。強堿性尿對比重的影響主要是尿液中的OH-中和了一部分H+，引起膜塊上的pH改變導至比重結果降低。實驗室檢測pH超過7.0時，在原尿比重基礎上應增加0.005，超過8.0時增加0.010。pH＞8.5時，對儀器報告的尿蛋白陽性標本均應通過其他方法加以證實。而作為兩性電解質的蛋白質，本身可電離出H+，與Na+從多聚電解質中解離出來的H+共同作用于尿比重膜塊上的指示劑，發生顯色反應，使比重檢測結果偏高。

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細菌和真菌對尿隱血的影響

尿隱血檢查是診斷泌尿系統疾病，特別是腎臟疾病的重要實驗指標之一。尿路感染的病例中，部分桿菌、球菌及真菌（主要為假絲酵母菌）一方面可能釋放過氧化物酶，另一方面為了代謝的需要在增殖過程中可能合成過氧化物酶、觸酶或超氧化物歧化酶。目前，尿隱血檢查是一種非特異性的檢測方法，上述酶類物質在尿隱血的干化學測定中，可不同程度地使試紙膜塊上的過氧化氫茴香素或過氧化氫稀枯分解出游離氧，引起色原顏色的變化，出現假陽性反應。大量實驗已經證實，尿中少量細菌和真菌對隱血無影響，但延長顯色時間有時也可呈弱陽性反應。不同細菌引起尿隱血的陽性程度不同，假單胞菌屬（如銅綠假單胞桿菌）最嚴重，桿菌強于真菌和球菌。大量細菌和真菌是引起干化學法尿隱血假陽性的原因之一。

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藥物對尿液檢驗的影響

?藥物具有生物活性，藥物本身及其代謝產物干擾尿液測定的現象并非少見。臨床治療中濫用抗生素的現象時有發生，許多新藥對臨床檢驗的干擾還尚未發現。藥物對尿液檢查的影響給實驗室檢查和臨床診斷增添了許多困難。

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青霉素是臨床最常用的抗生素，滴注后76%于6 h內以原形從尿中排出。青霉素結構中含有類似蛋白質分子結構中的肽鍵，可使磺柳酸法結果增強，而干化學法結果減弱。干化學法是基于試紙帶膜塊上pH值的變化。青霉素分子結構中的-COOH可電離出H+，可能通過H+影響pH值的變化而導至尿蛋白的陽性減弱。因此，靜脈滴注青霉素最好5~6 h后再做尿液檢查，對蛋白尿患者使用青霉素治療時，不同的測定方法應考慮不同的干擾作用，干化學法可使結果減弱甚至為假陰性。氧哌嗪青霉素僅影響磺柳酸法尿蛋白的測定，而不影響干化學法的檢測。氧哌嗪是青霉素的衍生物，靜滴后主要以原形從尿中排出。氧哌嗪分子結構中含有兩個牢固結合的肽鍵，與磺柳酸可發生明顯的結合，產生類似尿蛋白的假陽性反應。因此，遇到磺柳酸法尿蛋白強陽性，與儀器檢測或顯微鏡檢查明顯不符時，應詳細詢問病情，了解用藥史，及時反饋給臨床。

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維生素C是最常用的維生素類藥物。本藥水溶性好，口服或滴注后體內代謝快，尿中濃度迅速升高。維生素C具有較強的還原性，對尿液成分測定的影響機制可理解為競爭性抑制反應，使結果減弱或出現假陰性。一般認為，常規劑量口服維生素C對實驗結果無影響，而大劑量口服特別是靜脈滴注時，30 min內尿中濃度即迅速升高，隨著尿液的濃縮其濃度不斷上升。高濃度的維生素C可影響尿中葡萄糖、隱血、膽紅素和亞硝酸鹽的測定。不同濃度的維生素C對尿液檢查的影響不同，同樣濃度的維生素C對尿液中不同成分的影響也不相同，不同批號的試紙抗維生素C的干擾不同。從事尿液分析的檢驗人員，應參照本實驗室的儀器和試紙，建立健全維生素C在多大濃度范圍內才對以上實驗產生影響及影響程度如何，選擇維生素C滴注后的最短取尿時間。

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干化學測定與尿液有形成分顯微鏡檢查的關系

干化學測定與白細胞顯微鏡檢查的關系? 干化學法白細胞檢查的原理是依賴于白細胞漿內粒細胞酯酶的存在。該酶作用于試紙膜塊上的吲哚酚酯游離出吲哚酚，吲哚酚與重氮鹽反應形成紫色縮合物。粒細胞酯酶主要存在于粒細胞質內，單核細胞含有少量，淋巴細胞中無此酶。因此，干化學法主要測定粒細胞。甲醛防腐尿液及應用某些藥物（如呋喃坦啶）時，可使尿白細胞呈假陽性。而陳舊性尿液中的膿細胞，尿中含有大量先鋒Ⅳ和慶大霉素，尿蛋白大于5 g/L，乳糜尿及深棕色尿均可導至尿白細胞陽性減弱或呈假陰性。由于干化學測定的原理與顯微鏡計數的形態學檢查是兩種截然不同的概念，所以有時出現結果不一致的情況。

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干化學測定與紅細胞顯微鏡檢查的關系? 顯微鏡血尿是許多泌尿系統疾病病理變化的初始信號之一，極少量紅細胞有時只表現為隱血陽性。臨床無癥狀的尿隱血陽性對疾病的早期診斷更為重要。尿隱血檢測包括尿液中的紅細胞和（或）紅細胞變形裂解后溢出的血紅蛋白。紅細胞和血紅蛋白均含有亞鐵血紅素，具有過氧化物酶樣活性，亞鐵血紅素還原試紙帶膜塊上的過氧化物釋放出游離氧，氧化色原顯色。因此尿隱血報告的陽性程度往往高于顯微鏡檢查的紅細胞數。許多患者紅細胞在腎臟或泌尿道中因滲透壓過低或pH值偏高而破壞，血紅蛋白釋放，出現所謂干化學檢查的假陽性現象。因此遇到與顯微鏡檢查結果不符時，一定要結合臨床加以分析，尋找原因，切不可一概對干化學法加以否定，更不可武斷地調節儀器的靈敏度。尿隱血假陰性主要見于維生素C的干擾所致。假陽性主要是尿液中存在對熱不穩定的酶（如過氧化物酶、類過氧化物酶）和肌紅蛋白。前者加熱后酶類破壞即轉為陰性，后者是一類特殊的疾病。

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干化學測定與管型顯微鏡檢查的關系? 尿液干化學檢查中,沒有管型的檢測項目。管型是尿液檢驗中最有意義的成分，是尿液中蛋白質、腎小管分泌物、變性的腎上皮細胞及其剝脫物、紅細胞或白細胞及其崩解產物在遠曲小管、集合管內形成的。所以尿液中出現管型時,絕大多數尿蛋白陽性。尿液中檢出病理性管型表示腎小管有一過性尿潴留，常可反映腎臟的病變。因此，必須嚴格按規定鏡檢，以保證管型不被漏診。

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干化學試紙帶受諸多因素的影響，不同尿液分析儀檢測的靈敏度也有一定差異。目前，任何一臺尿液分析儀只能起顯微鏡檢查的過篩實驗，即使可進行無玻片鏡檢及細胞分布直方圖報告的電腦遙控顯像尿液分析儀，也不能完全取代顯微鏡?；谝陨显颍瑢嶒炇倚枰Ｒ庣R檢的情況至少應包括:（1）泌尿系統或可疑泌尿系統疾病的患者；（2）尿蛋白、白細胞、紅細胞、亞硝酸鹽有陽性者或四項均陰性而尿維生素C（++）以上或標本留取前使用了對尿液檢查有影響的藥物；（3）可疑尿中有管型、腎上皮細胞、亞硝酸鹽還原酶陰性的細菌、病理性結晶等異常成分；（4）尿液混濁或尿色異常者；（5）近期內尿檢異常正在治療觀察的患者。

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減小誤差，提高尿液分析的準確性

標本的采集與放置? 干化學檢查要求尿液應新鮮，最好不要超過2 h。長時間放置的尿標本，某些化學成分或有形成分可能會分解、破壞或轉化成其他成分（待測物或非待測物），從而直接或間接影響結果的準確性。例如尿液中大量繁殖的細菌在葡萄糖和蛋白質的分解過程中，細菌大量增加，葡萄糖和蛋白質逐漸減少；紅細胞無氧酵解過程中對葡萄糖的利用及各種細胞成分的破壞，都不同程度地增加了實驗的誤差。又如新鮮尿中的酮體形式主要為乙酰乙酸，長時間放置的尿標本，乙酰乙酸的含量逐漸降低，而丙酮和β-羥丁酸逐漸增高，由于三種酮體物質檢測的靈敏度差異甚大，勢必造成同一份標本應用同一臺儀器和試紙在不同時間檢測結果的差異。干化學檢查更不可應用加入防腐劑（如甲苯、甲醛）和抑制劑（如氟化鈉）的尿液，否則加入的化學試劑將直接影響到某些成分的測定。

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干化學試紙的保存、浸濕時間及測試溫度? 干化學試紙一旦啟封應盡快用完，且每次使用后必須緊塞筒蓋，勿放入冰箱保存，以免被空氣氧化或吸水變質。由于各項目的檢測原理不同，延長浸濕時間加之室內溫度增高，可使葡萄糖、蛋白質、膽紅素和尿膽原的陽性增強，而酮體陽性減弱，pH值降低。禁止用手觸摸試紙帶上任何一個測試膜塊，浸濕后的試紙帶不宜甩動，以免互相污染影響結果。因此尿液檢查必須標準化，試紙浸濕時間應嚴格控制在2 s或規定的時間，啟封后應在1周內用完，保存于室溫在15 ℃~25 ℃的通風干燥處為宜。

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使用配套試紙、定期校準儀器、開展室內室間質控? 由于尿試紙帶各項目的檢測原理不同，同一項目不同廠家的試紙反應原理也不盡相同，各膜塊反應的靈敏度及色澤變化也存在一定差異。所以不同儀器和試紙對同一標本的測定結果可能存在一定誤差，同一儀器、同一標本應用不同廠家試紙測定的結果也可能有一定差別。因此建議各實驗室不可頻繁更換試紙廠家。同時，應積極開展室內室間質量控制。室間質控可隨時觀察儀器的重復性與否，室內質控可及時發現儀器的準確性與否。定期用高低質控物作對照，用校正帶校準儀器，在無可比性對照方法的情況下，不要隨意調整儀器檢測的靈敏度。