單克隆抗體中兩次篩選分別是什么方法
第二次篩選出能產生特異性抗體的雜交瘤細胞,用連續注射抗原,下面具體介紹一下:
1、在實際免疫過程中,由于采用連續注射抗原的方法,且一種抗原決定簇刺激機體形成相對應的一種效應B淋巴細胞,因此,從小鼠脾臟中取出的效應B淋巴細胞的特異性是不同的,經HAT培養液篩選的雜交瘤細胞特異性也存在差異,所以必須從雜交瘤細胞群中篩選出能產生針對某一預定抗原快定簇的特異性雜交瘤細胞;
2、通常采用有限稀釋克隆細胞的方法,將雜交瘤細胞多倍稀釋,接種在多孔的細胞培養板上,使每一孔含一個或幾個雜交瘤細胞(理論上30%的孔中細胞數為0時,才能保證有些孔中是單個細胞),再由這些單細胞克隆生長,最終選出分泌預定特異抗體的雜交細胞株進行擴大培養。
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