尿干化學試帶的檢測原理
尿的干化學試帶可檢測的項目有蛋白質、葡萄糖、酮體、隱血、膽紅素、尿膽原、亞硝酸鹽、比重、PH值等。
(1) 蛋白質(PRO):PH指示劑蛋白誤差原理。干化學試紙中含有溴酚藍、枸櫞酸緩沖系統及表面活性劑,其中溴酚藍的PH閾為3.0-4.6,在PH3.2時會產生陰離子,與帶陽離子的蛋白質結合后產生顏色反應,本試劑只適合于白蛋白的檢測,球蛋白濃度高時呈弱陽性。
(2) 隱血(BLD):血紅蛋白中含有血紅素基團,具有過氧化物酶活性,可使試帶中的過氧化物(如過氧化氫茴香素)放出新生氧,將鄰聯甲苯胺受體氧化成藍色化合物。本試帶不能區分血紅蛋白和肌紅蛋白,與血紅蛋白起反應時呈均勻的綠-藍色;與紅細胞起反應時呈斑點狀綠-藍色。
(3) 葡萄糖(GLU):葡萄糖氧化酶法。試紙中含有葡萄糖氧化酶、過氧化物酶、緩沖劑及顯色原。尿液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下,天生葡萄糖酸內酯和過氧化氫,后者在過氧化物酶的催化下使色素原(如鄰聯甲苯胺、碘化鉀等)氧化而呈色。
(4) 酮體(KET):尿酮體包括乙酰乙酸、丙酮和β-羥丁酸。含酮體的尿液中加亞硝基鐵氰化鈉后,與氨液接觸時出現紫紅色環。
(5) 白細胞(LEU):粒細胞中存在酯酶,能作用于試紙中的吲哚酚酯(特異性酯酶底物),使后者開釋出吲哚酚,吲哚酚又與重氮鹽發生反應形成紫色絡合物,根據顯色深淺換算白細胞數。本實驗只能檢測出粒細胞,而不能檢測淋巴細胞。
(6) 亞硝酸鹽(NIT):Griess實驗原理。試紙中含有對氨基苯胂酸,被亞硝酸鹽重氮化而成重氮鹽,后者與1,2,3,4-四氫苯并喹啉-3酚偶聯產生粉紅色。當尿液中含有硝酸鹽還原陽性菌(如大腸埃希氏菌)存在并繁殖時,呈陽性反應。而球菌、真菌或支原體感染時呈陰性反應。
(7) 比重(SG):試紙中含有高分子電解質甲乙烯酸/馬來酸及指示劑麝香草酚藍等,高分子電解質的COONˉ基與尿中的電解質發生反應時開釋出H+,后著使指示劑變色。
(8) 膽紅素(BIL):重氮反應原理。試紙中含有2,4,2-三氯苯胺重氮鹽,在強酸介質中葡萄糖醛酸膽紅素與2,4,2-三氯苯胺重氮鹽起偶聯反應呈紫紅色。
(9) 尿膽原(UBG):重氮反應原理。