關于DNA酶切及凝膠電泳的注意事項介紹
1.酶切時所加的DNA溶液體積不能太大，否則DNA溶液中其他成分會干擾酶反應。
2、酶活力通常用酶單位（U）表示，酶單位的定義是：在最適反應條件下，1小時完全降解1mg lDNA的酶量為一個單位，但是許多實驗制備的DNA不象lDNA那樣易于降解，需適當增加酶的使用量。反應液中加入過量的酶是不合適的，除考慮成本外，酶液中的微量雜質可能干擾隨后的反應。
3、市場銷售的酶一般濃度很大，為節約起見，使用時可事先用酶反應緩沖液（1×）進行稀釋。另外，酶通常保存在50%的甘油中，實驗中，應將反應液中甘油濃度控制在1/10之下，否則，酶活性將受影響。
4、 觀察DNA離不開紫外透射儀,可是紫外光對DNA分子有切割作用。從膠上回收DNA時,應盡量縮短光照時間并采用長波長紫外燈(300-360nm）,以減少紫外光切割DNA。
5、 EB是強誘變劑并有中等毒性,配制和使用時都應戴手套,并且不要把EB灑到桌面或地面上。凡是沾污了EB的容器或物品必須經專門處理后才能清洗或丟棄。
6、 當EB太多,膠染色過深,DNA帶看不清時,可將膠放入蒸餾水沖泡,30分鐘后再觀察。
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技術原理
