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PCR實(shí)驗(yàn)中Ct值出現(xiàn)過(guò)晚（Ct>38）的原因

2022.10.19

(1)擴(kuò)增效率低: 優(yōu)化反應(yīng)條件；設(shè)計(jì)更好的引物或探針；改用三步法進(jìn)行反應(yīng)等。

(2)模版降解或模版濃度太高。

(3)試劑靈敏度不好：更換更高靈敏度、抗干擾的試劑。

(4)檢測(cè)基因結(jié)構(gòu)復(fù)雜：高GC、復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)和長(zhǎng)片段模版，都會(huì)影響PCR擴(kuò)增。

(5)擴(kuò)增產(chǎn)物太長(zhǎng): 一般采用80-150bp的產(chǎn)物長(zhǎng)度。


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