PCR擴增中CT值的意義
在PCR擴增反應的最初數個循環里,熒光信號變化不大,接近一條直線,這樣的直線即是基線,這條線是可以自動生成也可以手動設置的。之后反應會進入指數增長期,這個期間擴增曲線具有高度重復性,在該期間,可設定一條熒光閾值線,它可以設定在熒光信號指數擴增階段任意位置上,但一般會將熒光閾值的缺省設置是 3-15 個循環的熒光信號的標準偏差的10 倍。每個反應管內的熒光信號到達設定的閾值時所經歷的循環數被稱為CT值,這個值與起始濃度的對數成線性關系,且該值具有重現性。
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? ? *線性圖譜
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? ? Ct值最大的意義就是用來計算目的基因的表達量,此時就有兩個概念容易被提及,那就是絕對定量和相對定量,絕對定量的目的是測定目的基因在樣本中的分子數目,即通常所說的拷貝數。相對定量的目的是測定目的基因在兩個或多個樣本中的含量的相對比例,而不需要知道它們在每個樣本中的拷貝數。
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