熒光定量PCR的CT值
如果有標(biāo)準曲線,按照標(biāo)準曲線計算。
一般都是相對量。則用delta delta CT方法來計算。舉例如下:
對照組基因A的CT值為20, 內(nèi)參(比如βactin)CT值15。實驗組基因A CT值18,內(nèi)參CT值14。
首先算加樣量:delta CT=15-14=1。2的1次方是2。也就是說實驗組的加樣量是對照組的2倍。
基因A: delta CT=20-18=2。2的2次方是4。也就是說基因A的量在實驗組是對照組的4倍。但是由于加樣量是2倍,所以4處以2=2,最后的相對量是2倍。
幾點注意:
1。必須確定擴增的特異性
2。 只有相同目標(biāo)的CT值才能相減(擴增效率有可能不同)
3。 2的某次方只是理論值,實際擴增效率低于2。
4。 最好不用Syber Green
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