T/CAICC 03-2021
蔬菜水果中毒死蜱的快速檢測 膠體金免疫層析法

Rapid detection of chlorpyrifos in vegetables and fruits Colloidal gold immunochromatography

被代替

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標準號

T/CAICC 03-2021

發布

2022年

總頁數

8頁

發布單位

中國團體標準

替代標準

T/CAICC 03-2023

當前最新

T/CAICC 03-2023

 

 

適用范圍

3　原理 本方法采用競爭抑制免疫層析原理。樣品中的毒死蜱經提取后與膠體金標記的特異性抗體結合，抑制了抗體和試紙條中檢測線（T線）上抗原的結合，從而導致檢測線顏色深淺的變化。通過檢測線與質控線（C線）顏色深淺比較，對樣品中毒死蜱進行定性判定。 4　試劑與材料 4.1　試劑 除另有說明外，所有試劑均為分析純，實驗室用水應符合GB/T 6682中二級水的要求。 4.1.1　甲醇（CH3OH）。 4.1.2　提取液：由膠體金免疫層析試紙條配套提供，或按照其說明書配制。 4.1.3　參考物質：毒死蜱參考物質的中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式、相對分子質量見表1，純度≥98%。 表1　毒死蜱參考物質的中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式、相對分子質量 中文名稱　英文名稱　CAS登錄號　分子式　相對分子質量 毒死蜱　Chlorpyrifos　2921-88-2　C9H11Cl3NO3PS　350.6 注：或等同可溯源物質。 4.2　溶液配制 4.2.1　毒死蜱標準儲備液（100 μg/mL）：準確稱取毒死蜱參考物質（4.1.3）1 mg，置于10 mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為100 μg/mL的毒死蜱標準儲備液。4℃避光保存，有效期6個月。 4.2.2　毒死蜱標準工作液（1 μg/mL）：精密移取毒死蜱標準儲備液（100 μg/mL）（4.2.1）0.1 mL，置于10 mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為1 μg/mL的毒死蜱標準工作液。臨用新配。 4.3　材料 毒死蜱膠體金免疫層析試紙條，適用基質為蔬菜水果。需在陰涼、干燥、避光條件下保存。 4.3.1　金標微孔（含膠體金標記的特異性抗體）。 4.3.2　檢測卡。 5　儀器與設備 5.1　電子天平：感量為0.01 g。 5.2　移液器：10 μL~200 μL、100 μL~1000 μL。 6　分析步驟 6.1　試樣制備 選取新鮮樣品，擦去表面泥土，剪成1 cm左右見方碎片，備用。 6.2　試樣提取 稱取2 g試樣（精確至0.05 g）放入離心管中，加入6 mL提取液（4.1.2），上下振蕩1 min，靜置5 min，上清液即為樣品待測液。 6.3　測定步驟 吸取100 μL樣品待測液于金標微孔（4.3.1）中，抽吸2~3次使混合均勻，室溫溫育3 min，吸取100 μL混勻液加入檢測卡的加樣孔中，室溫反應10 min后進行結果判定。 注1：測定步驟建議按照試紙條說明書。 注2：結果判定建議使用讀數儀，讀數儀的具體使用參照儀器使用說明書。 6.4　質控試驗 每批樣品應同時進行空白試驗和加標質控試驗。 6.4.1　空白試驗 稱取空白試樣，按照6.2和6.3步驟與樣品同法操作。 6.4.2　加標質控試驗 準確稱取空白試樣2 g（精確至0.05 g）放入離心管中，加入40 μL毒死蜱標準工作液（1 μg/mL）（4.2.2），使試樣中毒死蜱濃度為0.02 mg/kg，按照6.2和6.3步驟與樣品同法操作。 7　結果判定 7.1　讀數儀測定 按讀數儀說明書要求操作，直接讀數并進行結果判定。 7.2　目視判定 通過對比質控線（C線）和檢測線（T線）的顏色深淺進行結果判定。目視判定示意圖見圖1。 7.2.1　無效 質控線（C線）不顯色，無論檢測線（T線）是否顯色，表明操作不正確或試紙條已失效，檢測結果無效。 7.2.2　陽性結果 質控線（C線）顯色，檢測線（T線）不顯色或顏色淺于質控線（C線），表明樣品中毒死蜱含量高于方法檢出限，判定為陽性。 7.2.3　陰性結果 質控線（C線）顯色，檢測線（T線）顏色深于質控線（C線）或與質控線（C線）顏色基本一致，表明樣品中毒死蜱含量低于方法檢出限，判定為陰性。 圖1　目視判定示意圖 7.3　質控試驗要求 空白試驗測定結果應為陰性，加標質控試驗測定結果應為陽性。 8　結果確認 當檢測結果為陽性時，應按照GB 2763指定方法標準進行確證。 9　性能指標 9.1　檢出限：0.02 mg/kg。 9.2　靈敏度：≥95%。 9.3　特異性：≥90%。 9.4　假陰性率：≤5%。 9.5　假陽性率：≤10%。 注：性能指標計算方法見附錄A。 10　其他 本方法所述試劑、試紙條信息及操作步驟是為給方法使用者提供方便，在使用本方法時不做限定。方法使用者應使用經過驗證的滿足本方法規定的各項性能指標的試劑、試紙條。

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