熒光強(qiáng)度的影響因素有哪些
1.熒光的減退。熒光物質(zhì)經(jīng)紫外線長時(shí)間照射及空氣的氧化作用,會使熒光逐漸減退。
2.熒光強(qiáng)度與溶液濃度的關(guān)系。在稀溶液中: F=Kc。F 為熒光強(qiáng)度K—檢測效率(由儀器決定) c 為液體的濃度高濃度時(shí),熒光物質(zhì)發(fā)生熄滅和自吸收現(xiàn)象,使F與c不呈線性關(guān)系。
3.溫度的影響。溫度對熒光強(qiáng)度的影響較敏感。溶液溫度下降時(shí),介質(zhì)的粘度增大,熒光物質(zhì)與分子的碰撞也隨之減少,去活化過程也減少,則熒光強(qiáng)度增加。相反,隨著溫度上升,熒光物質(zhì)與分子的碰撞頻率增加,使去活化幾率增加,則熒光強(qiáng)度下降。
4. pH值的影響。帶有酸性或堿性官能團(tuán)的大多數(shù)芳香族化合物的熒光一般都與溶液PH值有關(guān),例如:在pH=7~12的溶液中苯胺以分子形式存在,會發(fā)出藍(lán)色熒光;而在pH<2或pH>13的溶液中苯胺以離子形式存在,都不會發(fā)出熒光。同時(shí)所用酸的種類也影響熒光的強(qiáng)度,例如:奎寧在硫酸溶液中的熒光比在鹽酸中的要強(qiáng)。
5.溶 劑。許多有機(jī)物及金屬的有機(jī)絡(luò)合物,在乙醇溶液中的熒光比在水溶液中強(qiáng)。乙醇、甘油、丙酮、氯仿及苯都是常用的有機(jī)溶劑,其中大多有熒光,應(yīng)設(shè)法避免;一般避免的辦法是稀釋,或加入一部分水。
6.熒光強(qiáng)度達(dá)到最高點(diǎn)所需要的時(shí)間不同,有的反應(yīng)加入試劑后熒光強(qiáng)度立即達(dá)到最高峰。有
的反應(yīng)需要經(jīng)過15~30分鐘才能達(dá)到最高峰。
7.有機(jī)溶劑中常有產(chǎn)生熒光的雜質(zhì),可用蒸餾法提純。橡皮塞、軟木塞及濾紙中也常有能溶于溶劑的一些帶熒光的物質(zhì)。