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有兩個內參基因時,目的基因的ct值怎么算

2022.1.10

如何通過熒光定量目的基因和GAPDH計算相對表達量
內參就是一個表達量在各個組基本保持不變的基因,又叫看家基因,比如常用的GAPDH, actin。或者18s rRNA也可以。
如果內參表達量一致,說明你PCR的上樣量一致,樣本的質量也一致。如果出入很大,說明你的樣本的濃度或者是質量有問題。測到的目的基因的表達量就不可靠了
管家基因是用來定量的。用來計算相對表達量。管家基因在相同量樣品中的表達量我們認為是一致的。然后根據這個量來計算你的基因在不同樣品中的表達量。所以每一個都需要單獨的樣品。基因組干擾需要你在提取RNA以后用DNase處理樣品。如果不放心,可以拿處理過的RNA做膜版,跑一次,如果有帶就是有污染,如果沒有可以合成cDNA庫了。

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